江蘇教育學(xué)院編

第一篇 基因工程和蛋白質(zhì)工程

　　第一章 　基因工程的分子生物學(xué)基礎(chǔ)

　　１．1遺傳信息傳遞的方向——中心法則　　　　　識(shí)記并理解　遺傳信息傳遞的三角形中心法則

　?。保?ＤＮＡ的復(fù)制　　　　　理解　ＤＮＡ復(fù)制的基本模式　　　　　識(shí)記?。模危翉?fù)制的特點(diǎn)及相關(guān)的概念

　　１．3ＤＮＡ聚合酶　　　　　識(shí)記　原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的ＤＮＡ聚合酶的種類

　?。保?原核和真核生物基因結(jié)構(gòu)的特征　　　　　識(shí)記并理解　原核和真核生物基因結(jié)構(gòu)的主要特征

　?。保?ＲＮＡ的轉(zhuǎn)錄和ＲＮＡ的加工　　　　　理解?。遥危梁铣傻幕咎卣鳌　　　　∽R(shí)記　原核和真核生物的ＲＮＡ聚合酶的組成　　　　　識(shí)記并理解　與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的ＤＮＡ序列　　　　　應(yīng)用　ＲＮＡ的轉(zhuǎn)錄過程及轉(zhuǎn)錄后的加工

　?。保?逆轉(zhuǎn)錄和逆轉(zhuǎn)錄酶　　　　　識(shí)記：轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄的概念

　?。保?翻譯——蛋白質(zhì)的生物合成　　　　　識(shí)記　翻譯的概念　　　　　理解　蛋白質(zhì)生物合成的過程及蛋白質(zhì)翻譯后的修飾、加工、折疊和剪接

　　１．8基因表達(dá)的調(diào)控　　　　　理解并應(yīng)用　原核基因表達(dá)的調(diào)控（主要為大腸桿菌的色氨酸操縱子和乳糖操縱子）及真核基因表達(dá)的調(diào)控

　　第二章　 基因工程的四大要素及實(shí)施要點(diǎn)

　?。玻?1基因工程操作中常用的工具酶

　?。玻?．1限制性內(nèi)切酶與甲基化酶（識(shí)記并理解）　?。玻?．2連接酶（識(shí)記并理解）　?。玻?．3用于基因工程中的修飾酶（識(shí)記并理解 種類）

　　２． 2基因的分離（識(shí)記并理解　基因分離的八種方法）

　?。玻?．1基因分離的物理化學(xué)方法（理解）　　２．2．2鳥槍法（不作要求）　?。玻?．3cＤＮＡ文庫(kù)的建立和基因的分離　　　　　　理解　cＤＮＡ文庫(kù)與基因文庫(kù)的區(qū)別　　　　　　識(shí)記　組建一個(gè)cＤＮＡ文庫(kù)的基本步驟　?。玻?．4直接從特定的mＲＮＡ分離基因（識(shí)記）　　２．2．5基因組文庫(kù)的建立和基因的分離（理解并應(yīng)用）　?。玻?．6從蛋白質(zhì)入手分離編碼此蛋白的基因（理解）　?。玻?．7基因的化學(xué)合成（理解并應(yīng)用）　?。玻?．8利用ＰＣＲ或ＲＴ－ＰＣＲ分離基因（與第五章５．８內(nèi)容相結(jié)合）

　?。玻?3基因工程載體

　?。玻?．1質(zhì)粒載體（識(shí)記并理解）　?。玻?．2入噬菌載體（理解）　?。玻?．3粘質(zhì)粒載體（理解）　?。玻?．4Ｍ１３噬菌體及噬菌粒（理解并應(yīng)用）　　２．3．5真核細(xì)胞用載體（識(shí)記）　?。玻?．6人工染色體：YACs、BACs、PACs、MACs、（識(shí)記）

　?。玻?4受體細(xì)胞和重組基因的導(dǎo)入（理解）

　?。玻?5基因重組的方法（理解并應(yīng)用）

　?。玻?6基因重組體的篩選（理解并應(yīng)用）

　　第三章 　與基因工程相關(guān)的一些理論和技術(shù)問題　　?。常?1外源基因在宿主細(xì)胞中的高效表達(dá)

　　３．1．1有效的轉(zhuǎn)錄起始與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．2mＲＮＡ的有效延伸和轉(zhuǎn)錄終止與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．3mＲＮＡ的穩(wěn)定性與基因的高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．4有效的翻譯起始與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．5遺傳密碼應(yīng)用偏倚性與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．6mＲＮＡ的二級(jí)結(jié)構(gòu)與基因的高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．7ＲＮＡ的加工與基因的高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　　３．1．8mＲＮＡ序列上終止密碼的選擇（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．9表達(dá)質(zhì)粒（或載體）的拷貝數(shù)及穩(wěn)定性與基因的高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．10外源蛋白的穩(wěn)定性與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）

　　３． 2基因的融合和融合蛋白的表達(dá)

　?。常?．1利用基因融合技術(shù)表達(dá)外源基因的原由（識(shí)記并理解）　?。常?．2基因融合的策略（應(yīng)用）　?。常?．3融合蛋白的親和純化（應(yīng)用）　?。常?．4融合蛋白的位點(diǎn)特異性切割（應(yīng)用）

3． 3外源蛋白的分泌表達(dá)

　?。常?．1外源基因在Ｅ．coli中的分泌表達(dá)（理解并應(yīng)用）　?。常?．2外源基因在枯草桿菌中的分泌表達(dá)（識(shí)記）　?。常?．3α－因子前導(dǎo)序列介導(dǎo)的酵母細(xì)胞分泌系統(tǒng)（理解并應(yīng)用）

　?。常?4關(guān)于重組蛋白的正確折疊及修飾

　?。常?．1蛋白質(zhì)折疊和可溶性表達(dá)（理解并應(yīng)用）　?。常?．2重組蛋白的重折疊（識(shí)記并理解）　　３．4．3外源蛋白在翻譯后的修飾（識(shí)記并理解）

　?。常?5幾種產(chǎn)生基因突變的方法

　?。常?．1寡核苷酸介導(dǎo)的基因突變的概述（識(shí)記并理解）　?。常?．2雙引物突變法（識(shí)記）　?。常?．3Ｋunkel突變法（識(shí)記并理解）　　３．5．4利用多聚酶鏈反應(yīng)產(chǎn)生突變體（與第五章的５．８內(nèi)容相結(jié)合）　?。常?．5盒式突變法（識(shí)記）

　　３． 6ＤＮＡ序列分析

　　３．6．1Ｓanger雙膠氧終止法（識(shí)記并理解）　?。常?．2Ｍaxam-GilbertDNA化學(xué)降解法（識(shí)記并理解）　?。常?．3關(guān)于變聚丙烯酰胺測(cè)序凝膠（識(shí)記）

　?。常?7基因的修飾及其對(duì)表達(dá)的影響

　?。常?．1引言（識(shí)記）　　　?。常?．2ＤＮＡ甲基化作用及基本特性（理解）　?。常?．3ＤＮＡ甲基化作用的生物功能（理解）　　３．7．4研究ＤＮＡ甲基化作用的手段（理解并應(yīng)用）

　　第四章　 蛋白質(zhì)工程概述（理解）

第五章 基因工程和蛋白質(zhì)工程的進(jìn)展

　?。担?COS細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)及其應(yīng)用（理解并應(yīng)用）

　　５．2哺乳動(dòng)物細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)系統(tǒng)（理解并應(yīng)用）

　?。担?核型多角體病毒為載體的昆蟲表達(dá)系統(tǒng)（理解并應(yīng)用）

　?。担?噬菌體顯示技術(shù)（識(shí)記并理解）

　?。担?粒子轟擊和基因轉(zhuǎn)移（理解）

　?。担?同源重組與基因?qū)ぐ校ㄗR(shí)記并理解）

　　５．7關(guān)于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（識(shí)記）

　?。担?聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)及其應(yīng)用進(jìn)展（理解ＰＣＲ的基本原理）

　　５．8．1影響ＰＣＲ產(chǎn)物質(zhì)量的因素（識(shí)記并理解）　?。担?．2ＰＣＲ相關(guān)技術(shù)（識(shí)記）　?。担?．3ＰＣＲ技術(shù)的應(yīng)用

　　５．9幾種有開發(fā)前景的研究

　?。担?．1轉(zhuǎn)錄因子的研究與治療藥物的開發(fā)（識(shí)記）　　５．9．2真核細(xì)胞受體的克隆和異源表達(dá)是作為藥物開發(fā)的新工具（識(shí)記）　?。担?．3反議核酸（識(shí)記）　?。担?．4關(guān)于ＤＮＡ疫苗（識(shí)記并理解）

　　第二篇 　酶工程　　　　第一章　 酶工程概述

　　1．1定義及特點(diǎn)（識(shí)記）

　　第二章 　酶的來源及酶反應(yīng)的特點(diǎn)

　?。玻?1酶的來源及微生物作為酶源的優(yōu)越性

　　２．1．1酶的主要應(yīng)用領(lǐng)域（識(shí)記并理解）　?。玻?．2微生物作為酶源的優(yōu)越性（識(shí)記并理解）

　　２． 2酶的分類及基本作用原理

　?。玻?．1酶的分類（識(shí)記）　?。玻?．2酶作用原理（識(shí)記并理解）　?。玻?．3酶的反應(yīng)特點(diǎn)及動(dòng)力學(xué)（理解并應(yīng)用）

　　第三章　 酶的分離純化及純度鑒定技術(shù)　　?。常?1酶的提取

　?。常?．1組織及細(xì)胞的破碎（識(shí)記 破碎方法）　?。常?．2酶的抽提（識(shí)記 抽提方法）

　?。常?2用于生化物質(zhì)分離的沉淀技術(shù)（理解 各種技術(shù)方法及其基本原理、影響因素）

　?。常?3各種分離純化技術(shù)的基本理論依據(jù)（理解）

　　３． 4凝膠過濾（理解并應(yīng)用 凝膠過濾的基本原理、凝膠的物化性質(zhì)、凝膠的種類、有關(guān)概念、凝膠過濾的基本操作）

　?。常?5吸附層析（理解并應(yīng)用 其基本原理及基本操作）

　?。常?6離子交換層析（理解并應(yīng)用 其基本原理、層析條件的選擇及基本操作）

　?。常?7高效液相色譜（識(shí)記HPLC儀器的基本組成 理解HPLC的載體、固定相及如何對(duì)物質(zhì)進(jìn)定性和定量分析）

　?。常?8親和層析（理解并應(yīng)用 基本原理、基本操作）

　?。常?9聚丙烯酰胺凝膠電泳（識(shí)記 聚丙烯酰胺凝膠的優(yōu)點(diǎn)理解并應(yīng)用 其基本原理及操作）

　　３．10等電聚焦（IEF）（理解 其基本原理 應(yīng)用 基本操作）

　?。常?1幾種其它的聚丙烯酰胺凝膠電泳（識(shí)記）

　?。常?2印跡轉(zhuǎn)移電泳（理解 基本原理 識(shí)記 技術(shù)特點(diǎn)）

　?。常?3各種分離純化技術(shù)的順序及銜接（識(shí)記并理解）

　　第四章　 固定化技術(shù)

　?。矗?1固定化技術(shù)的發(fā)展史（識(shí)記）

　?。矗?2固定化技術(shù)（識(shí)記）

　?。矗?．1方法（理解并應(yīng)用）　?。矗?．2載體（識(shí)記并理解）

　?。矗?3固定化技術(shù)的新進(jìn)展（識(shí)記）

　?。矗?4生物傳感器為酶工程開拓了新的發(fā)展領(lǐng)域（識(shí)記）

　　第五章　 多酶反應(yīng)器　　　　５． 1意義（應(yīng)用）　?。担?2多酶反應(yīng)器的設(shè)計(jì)目標(biāo)和要求（識(shí)記）　?。担?3使用多酶反應(yīng)器時(shí)的一些注意事項(xiàng)（識(shí)記）

　　第六章　 化學(xué)修飾及蛋白質(zhì)工程等新技術(shù)為酶的開發(fā)和改造提供是新途徑

　?。叮?1酶的化學(xué)修飾（識(shí)記）　　６． 2基因工程技術(shù)為酶的生產(chǎn)提供新途徑（識(shí)記）　?。叮?3蛋白質(zhì)工程技術(shù)為酶的定向改造提供新手段（識(shí)記）

　　第七章　 酶工程發(fā)展的現(xiàn)狀和展望（應(yīng)用）

　　第三篇　 細(xì)胞工程

　　第一章　 抗體產(chǎn)生的機(jī)理

　　１．1抗體的概念（識(shí)記）

　?。保?抗體形成的理論（理解　抗體形成的選擇學(xué)說）

　?。保?免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu)（識(shí)記并理解　四肽鏈結(jié)構(gòu)及功能區(qū)）

　?。保?免疫球蛋白的分子片段（識(shí)記）

　　１．5免疫球蛋白的基因結(jié)構(gòu)（理解）

　?。保?抗體多樣性的基因基礎(chǔ)（理解）

　　１．7抗體多樣性的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)（理解）

　?。保?抗體制備技術(shù)的發(fā)展（識(shí)記）

　?。保?．1雙功能抗體（識(shí)記并理解）　　１．8．2抗獨(dú)特型抗體（識(shí)記并理解）　?。保?．3人一鼠嵌合抗體（識(shí)記）　　１．8．4重構(gòu)型抗體（識(shí)記）　?。保?．5小分子抗體（識(shí)記）　?。保?．6表位定向選擇技術(shù)在鼠抗體的人源化中的應(yīng)用（識(shí)記）　?。保?．7抗體庫(kù)技術(shù)（識(shí)記）　?。保?．8噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)（識(shí)記并理解）　　　　第二章　 細(xì)胞工程抗體　　　　　　２． 1小鼠體系（識(shí)記）

　?。玻?2融合前的準(zhǔn)備工作

　　２．2．1組織培養(yǎng)材料的準(zhǔn)備（識(shí)記 組培所需的材料）　?。玻?．2抗原免疫（識(shí)記并理解 抗原的概念 應(yīng)用 免疫前的動(dòng)物選擇）

　?。玻?3細(xì)胞融合（理解并應(yīng)用）

　?。玻?4融合后的管理（理解并就應(yīng)用 融合后的篩選、克隆概念及相關(guān)技術(shù)、單克隆抗體制備的技術(shù)、細(xì)胞的冷凍和解凍）

　　第三章　 人單克隆抗體的制備

　?。常?1制備人單抗的技術(shù)路線（識(shí)記 人源化抗體制備的技術(shù)路線）

　?。常?．1EB病毒轉(zhuǎn)化技術(shù)（識(shí)記EBV的生物學(xué)特性、EBV轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的安全問題 理解并應(yīng)用EBV的制備、B細(xì)胞的EBV的轉(zhuǎn)化、EBV轉(zhuǎn)化B細(xì)胞的克?。　。常?．2B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備人單抗（應(yīng)用）

　　３． 2人源抗體制備中的難點(diǎn)及新技術(shù)方法（識(shí)記一些新方法）

　第四章　 單克隆抗體在腫瘤治療中的應(yīng)用

　?。矗?單克隆抗體在體外的應(yīng)用（識(shí)記并理解）　?。矗?單克隆抗體在體內(nèi)的應(yīng)用（識(shí)記并理解）

　　附錄：雜交瘤單克隆抗體技術(shù)（應(yīng)用）

　　第四篇 　發(fā)酵工程及其進(jìn)展

　　第一章 　概述

　　１．1歷史的回顧（識(shí)記）　?。保?生物技術(shù)的發(fā)展使發(fā)酵工業(yè)進(jìn)入了新時(shí)代（識(shí)記）

　第二章　 優(yōu)良菌種的選育

　?。玻?菌種分離、篩選的原則與步驟（理解并應(yīng)用）　?。玻?產(chǎn)生特殊物質(zhì)的微生物篩選（識(shí)記并理解）　　２．3自然選育（識(shí)記）　?。玻?誘變育種（識(shí)記并理解）

　　第三章　 代謝調(diào)控和代謝工程　　　?。常?代謝調(diào)控（理解并應(yīng)用）　　３．2代謝工程（理解并應(yīng)用）

　　第四章 　發(fā)酵與產(chǎn)物分離偶聯(lián)

　?。矗?發(fā)酵與產(chǎn)物分離偶聯(lián)的基礎(chǔ)（識(shí)記并理解）　　４．2偶聯(lián)技術(shù)的應(yīng)用（理解并應(yīng)用）

　　第五章　 發(fā)酵過程的優(yōu)化與控制

　?。担?發(fā)酵過程的測(cè)量（應(yīng)用）　　５．2發(fā)酵過程模型化（應(yīng)用）　?。担?發(fā)酵過程控制（應(yīng)用）

　　選用教材:

江蘇教育學(xué)院編

第一篇 基因工程和蛋白質(zhì)工程

　　第一章 　基因工程的分子生物學(xué)基礎(chǔ)

　?。保?遺傳信息傳遞的方向——中心法則　　　　　識(shí)記并理解　遺傳信息傳遞的三角形中心法則

　?。保?ＤＮＡ的復(fù)制　　　　　理解?。模危翉?fù)制的基本模式　　　　　識(shí)記?。模危翉?fù)制的特點(diǎn)及相關(guān)的概念

　?。保?ＤＮＡ聚合酶　　　　　識(shí)記　原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的ＤＮＡ聚合酶的種類

　?。保?原核和真核生物基因結(jié)構(gòu)的特征　　　　　識(shí)記并理解　原核和真核生物基因結(jié)構(gòu)的主要特征

　?。保?ＲＮＡ的轉(zhuǎn)錄和ＲＮＡ的加工　　　　　理解?。遥危梁铣傻幕咎卣鳌　　　　∽R(shí)記　原核和真核生物的ＲＮＡ聚合酶的組成　　　　　識(shí)記并理解　與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的ＤＮＡ序列　　　　　應(yīng)用　ＲＮＡ的轉(zhuǎn)錄過程及轉(zhuǎn)錄后的加工

　　１．6逆轉(zhuǎn)錄和逆轉(zhuǎn)錄酶　　　　　識(shí)記：轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄的概念

　?。保?翻譯——蛋白質(zhì)的生物合成　　　　　識(shí)記　翻譯的概念　　　　　理解　蛋白質(zhì)生物合成的過程及蛋白質(zhì)翻譯后的修飾、加工、折疊和剪接

　?。保?基因表達(dá)的調(diào)控　　　　　理解并應(yīng)用　原核基因表達(dá)的調(diào)控（主要為大腸桿菌的色氨酸操縱子和乳糖操縱子）及真核基因表達(dá)的調(diào)控

　　第二章　 基因工程的四大要素及實(shí)施要點(diǎn)

　　２． 1基因工程操作中常用的工具酶

　?。玻?．1限制性內(nèi)切酶與甲基化酶（識(shí)記并理解）　?。玻?．2連接酶（識(shí)記并理解）　?。玻?．3用于基因工程中的修飾酶（識(shí)記并理解 種類）

　　２． 2基因的分離（識(shí)記并理解　基因分離的八種方法）

　?。玻?．1基因分離的物理化學(xué)方法（理解）　?。玻?．2鳥槍法（不作要求）　?。玻?．3cＤＮＡ文庫(kù)的建立和基因的分離　　　　　　理解　cＤＮＡ文庫(kù)與基因文庫(kù)的區(qū)別　　　　　　識(shí)記　組建一個(gè)cＤＮＡ文庫(kù)的基本步驟　?。玻?．4直接從特定的mＲＮＡ分離基因（識(shí)記）　　２．2．5基因組文庫(kù)的建立和基因的分離（理解并應(yīng)用）　?。玻?．6從蛋白質(zhì)入手分離編碼此蛋白的基因（理解）　　２．2．7基因的化學(xué)合成（理解并應(yīng)用）　?。玻?．8利用ＰＣＲ或ＲＴ－ＰＣＲ分離基因（與第五章５．８內(nèi)容相結(jié)合）

　　２． 3基因工程載體

　?。玻?．1質(zhì)粒載體（識(shí)記并理解）　?。玻?．2入噬菌載體（理解）　　２．3．3粘質(zhì)粒載體（理解）　?。玻?．4Ｍ１３噬菌體及噬菌粒（理解并應(yīng)用）　?。玻?．5真核細(xì)胞用載體（識(shí)記）　?。玻?．6人工染色體：YACs、BACs、PACs、MACs、（識(shí)記）

　?。玻?4受體細(xì)胞和重組基因的導(dǎo)入（理解）

　　２． 5基因重組的方法（理解并應(yīng)用）

　?。玻?6基因重組體的篩選（理解并應(yīng)用）

　　第三章 　與基因工程相關(guān)的一些理論和技術(shù)問題　　?。常?1外源基因在宿主細(xì)胞中的高效表達(dá)

　?。常?．1有效的轉(zhuǎn)錄起始與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　　３．1．2mＲＮＡ的有效延伸和轉(zhuǎn)錄終止與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．3mＲＮＡ的穩(wěn)定性與基因的高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．4有效的翻譯起始與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　　３．1．5遺傳密碼應(yīng)用偏倚性與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．6mＲＮＡ的二級(jí)結(jié)構(gòu)與基因的高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　　３．1．7ＲＮＡ的加工與基因的高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．8mＲＮＡ序列上終止密碼的選擇（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．9表達(dá)質(zhì)粒（或載體）的拷貝數(shù)及穩(wěn)定性與基因的高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）　?。常?．10外源蛋白的穩(wěn)定性與基因高效表達(dá)（識(shí)記并應(yīng)用）

　?。常?2基因的融合和融合蛋白的表達(dá)

　?。常?．1利用基因融合技術(shù)表達(dá)外源基因的原由（識(shí)記并理解）　?。常?．2基因融合的策略（應(yīng)用）　?。常?．3融合蛋白的親和純化（應(yīng)用）　　３．2．4融合蛋白的位點(diǎn)特異性切割（應(yīng)用）

3． 3外源蛋白的分泌表達(dá)

　?。常?．1外源基因在Ｅ．coli中的分泌表達(dá)（理解并應(yīng)用）　　３．3．2外源基因在枯草桿菌中的分泌表達(dá)（識(shí)記）　?。常?．3α－因子前導(dǎo)序列介導(dǎo)的酵母細(xì)胞分泌系統(tǒng)（理解并應(yīng)用）

　　３． 4關(guān)于重組蛋白的正確折疊及修飾

　?。常?．1蛋白質(zhì)折疊和可溶性表達(dá)（理解并應(yīng)用）　　３．4．2重組蛋白的重折疊（識(shí)記并理解）　?。常?．3外源蛋白在翻譯后的修飾（識(shí)記并理解）

　?。常?5幾種產(chǎn)生基因突變的方法

　　３．5．1寡核苷酸介導(dǎo)的基因突變的概述（識(shí)記并理解）　?。常?．2雙引物突變法（識(shí)記）　?。常?．3Ｋunkel突變法（識(shí)記并理解）　　３．5．4利用多聚酶鏈反應(yīng)產(chǎn)生突變體（與第五章的５．８內(nèi)容相結(jié)合）　?。常?．5盒式突變法（識(shí)記）

　?。常?6ＤＮＡ序列分析

　?。常?．1Ｓanger雙膠氧終止法（識(shí)記并理解）　　３．6．2Ｍaxam-GilbertDNA化學(xué)降解法（識(shí)記并理解）　?。常?．3關(guān)于變聚丙烯酰胺測(cè)序凝膠（識(shí)記）

　　３． 7基因的修飾及其對(duì)表達(dá)的影響

　?。常?．1引言（識(shí)記）　　　　３．7．2ＤＮＡ甲基化作用及基本特性（理解）　?。常?．3ＤＮＡ甲基化作用的生物功能（理解）　?。常?．4研究ＤＮＡ甲基化作用的手段（理解并應(yīng)用）

　　第四章　 蛋白質(zhì)工程概述（理解）

第五章 基因工程和蛋白質(zhì)工程的進(jìn)展

　?。担?COS細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)及其應(yīng)用（理解并應(yīng)用）

　?。担?哺乳動(dòng)物細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)系統(tǒng)（理解并應(yīng)用）

　?。担?核型多角體病毒為載體的昆蟲表達(dá)系統(tǒng)（理解并應(yīng)用）

　?。担?噬菌體顯示技術(shù)（識(shí)記并理解）

　　５．5粒子轟擊和基因轉(zhuǎn)移（理解）

　?。担?同源重組與基因?qū)ぐ校ㄗR(shí)記并理解）

　?。担?關(guān)于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（識(shí)記）

　?。担?聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)及其應(yīng)用進(jìn)展（理解ＰＣＲ的基本原理）

　?。担?．1影響ＰＣＲ產(chǎn)物質(zhì)量的因素（識(shí)記并理解）　　５．8．2ＰＣＲ相關(guān)技術(shù)（識(shí)記）　?。担?．3ＰＣＲ技術(shù)的應(yīng)用

　?。担?幾種有開發(fā)前景的研究

　　５．9．1轉(zhuǎn)錄因子的研究與治療藥物的開發(fā)（識(shí)記）　?。担?．2真核細(xì)胞受體的克隆和異源表達(dá)是作為藥物開發(fā)的新工具（識(shí)記）　?。担?．3反議核酸（識(shí)記）　?。担?．4關(guān)于ＤＮＡ疫苗（識(shí)記并理解）

　　第二篇 　酶工程　　　　第一章　 酶工程概述

　　1．1定義及特點(diǎn)（識(shí)記）

　　第二章 　酶的來源及酶反應(yīng)的特點(diǎn)

　?。玻?1酶的來源及微生物作為酶源的優(yōu)越性

　?。玻?．1酶的主要應(yīng)用領(lǐng)域（識(shí)記并理解）　　２．1．2微生物作為酶源的優(yōu)越性（識(shí)記并理解）

　?。玻?2酶的分類及基本作用原理

　　２．2．1酶的分類（識(shí)記）　?。玻?．2酶作用原理（識(shí)記并理解）　?。玻?．3酶的反應(yīng)特點(diǎn)及動(dòng)力學(xué)（理解并應(yīng)用）

　　第三章　 酶的分離純化及純度鑒定技術(shù)　　?。常?1酶的提取

　　３．3．1組織及細(xì)胞的破碎（識(shí)記 破碎方法）　?。常?．2酶的抽提（識(shí)記 抽提方法）

　?。常?2用于生化物質(zhì)分離的沉淀技術(shù)（理解 各種技術(shù)方法及其基本原理、影響因素）

　?。常?3各種分離純化技術(shù)的基本理論依據(jù)（理解）

　?。常?4凝膠過濾（理解并應(yīng)用 凝膠過濾的基本原理、凝膠的物化性質(zhì)、凝膠的種類、有關(guān)概念、凝膠過濾的基本操作）

　?。常?5吸附層析（理解并應(yīng)用 其基本原理及基本操作）

　　３． 6離子交換層析（理解并應(yīng)用 其基本原理、層析條件的選擇及基本操作）

　?。常?7高效液相色譜（識(shí)記HPLC儀器的基本組成 理解HPLC的載體、固定相及如何對(duì)物質(zhì)進(jìn)定性和定量分析）

　?。常?8親和層析（理解并應(yīng)用 基本原理、基本操作）

　?。常?9聚丙烯酰胺凝膠電泳（識(shí)記 聚丙烯酰胺凝膠的優(yōu)點(diǎn)理解并應(yīng)用 其基本原理及操作）

　　３．10等電聚焦（IEF）（理解 其基本原理 應(yīng)用 基本操作）

　?。常?1幾種其它的聚丙烯酰胺凝膠電泳（識(shí)記）

　　３．12印跡轉(zhuǎn)移電泳（理解 基本原理 識(shí)記 技術(shù)特點(diǎn)）

　?。常?3各種分離純化技術(shù)的順序及銜接（識(shí)記并理解）

　　第四章　 固定化技術(shù)

　　４． 1固定化技術(shù)的發(fā)展史（識(shí)記）

　?。矗?2固定化技術(shù)（識(shí)記）

　?。矗?．1方法（理解并應(yīng)用）　　４．2．2載體（識(shí)記并理解）

　?。矗?3固定化技術(shù)的新進(jìn)展（識(shí)記）

　?。矗?4生物傳感器為酶工程開拓了新的發(fā)展領(lǐng)域（識(shí)記）

　　第五章　 多酶反應(yīng)器　　　?。担?1意義（應(yīng)用）　?。担?2多酶反應(yīng)器的設(shè)計(jì)目標(biāo)和要求（識(shí)記）　　５． 3使用多酶反應(yīng)器時(shí)的一些注意事項(xiàng)（識(shí)記）

　　第六章　 化學(xué)修飾及蛋白質(zhì)工程等新技術(shù)為酶的開發(fā)和改造提供是新途徑

　　６． 1酶的化學(xué)修飾（識(shí)記）　?。叮?2基因工程技術(shù)為酶的生產(chǎn)提供新途徑（識(shí)記）　?。叮?3蛋白質(zhì)工程技術(shù)為酶的定向改造提供新手段（識(shí)記）

　　第七章　 酶工程發(fā)展的現(xiàn)狀和展望（應(yīng)用）

　　第三篇　 細(xì)胞工程

　　第一章　 抗體產(chǎn)生的機(jī)理

　?。保?抗體的概念（識(shí)記）

　?。保?抗體形成的理論（理解　抗體形成的選擇學(xué)說）

　?。保?免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu)（識(shí)記并理解　四肽鏈結(jié)構(gòu)及功能區(qū)）

　?。保?免疫球蛋白的分子片段（識(shí)記）

　?。保?免疫球蛋白的基因結(jié)構(gòu)（理解）

　?。保?抗體多樣性的基因基礎(chǔ)（理解）

　　１．7抗體多樣性的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)（理解）

　?。保?抗體制備技術(shù)的發(fā)展（識(shí)記）

　　１．8．1雙功能抗體（識(shí)記并理解）　　１．8．2抗獨(dú)特型抗體（識(shí)記并理解）　?。保?．3人一鼠嵌合抗體（識(shí)記）　　１．8．4重構(gòu)型抗體（識(shí)記）　?。保?．5小分子抗體（識(shí)記）　?。保?．6表位定向選擇技術(shù)在鼠抗體的人源化中的應(yīng)用（識(shí)記）　?。保?．7抗體庫(kù)技術(shù)（識(shí)記）　?。保?．8噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)（識(shí)記并理解）　　　　第二章　 細(xì)胞工程抗體　　　　　?。玻?1小鼠體系（識(shí)記）

　　２． 2融合前的準(zhǔn)備工作

　?。玻?．1組織培養(yǎng)材料的準(zhǔn)備（識(shí)記 組培所需的材料）　　２．2．2抗原免疫（識(shí)記并理解 抗原的概念 應(yīng)用 免疫前的動(dòng)物選擇）

　?。玻?3細(xì)胞融合（理解并應(yīng)用）

　　２． 4融合后的管理（理解并就應(yīng)用 融合后的篩選、克隆概念及相關(guān)技術(shù)、單克隆抗體制備的技術(shù)、細(xì)胞的冷凍和解凍）

　　第三章　 人單克隆抗體的制備

　?。常?1制備人單抗的技術(shù)路線（識(shí)記 人源化抗體制備的技術(shù)路線）

　?。常?．1EB病毒轉(zhuǎn)化技術(shù)（識(shí)記EBV的生物學(xué)特性、EBV轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的安全問題 理解并應(yīng)用EBV的制備、B細(xì)胞的EBV的轉(zhuǎn)化、EBV轉(zhuǎn)化B細(xì)胞的克隆）　?。常?．2B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備人單抗（應(yīng)用）

　?。常?2人源抗體制備中的難點(diǎn)及新技術(shù)方法（識(shí)記一些新方法）

　第四章　 單克隆抗體在腫瘤治療中的應(yīng)用

　　４．1單克隆抗體在體外的應(yīng)用（識(shí)記并理解）　?。矗?單克隆抗體在體內(nèi)的應(yīng)用（識(shí)記并理解）

　　附錄：雜交瘤單克隆抗體技術(shù)（應(yīng)用）

　　第四篇 　發(fā)酵工程及其進(jìn)展

　　第一章 　概述

　?。保?歷史的回顧（識(shí)記）　?。保?生物技術(shù)的發(fā)展使發(fā)酵工業(yè)進(jìn)入了新時(shí)代（識(shí)記）

　第二章　 優(yōu)良菌種的選育

　?。玻?菌種分離、篩選的原則與步驟（理解并應(yīng)用）　?。玻?產(chǎn)生特殊物質(zhì)的微生物篩選（識(shí)記并理解）　　２．3自然選育（識(shí)記）　?。玻?誘變育種（識(shí)記并理解）

　　第三章　 代謝調(diào)控和代謝工程　　　　３．1代謝調(diào)控（理解并應(yīng)用）　?。常?代謝工程（理解并應(yīng)用）

　　第四章 　發(fā)酵與產(chǎn)物分離偶聯(lián)

　　４．1發(fā)酵與產(chǎn)物分離偶聯(lián)的基礎(chǔ)（識(shí)記并理解）　?。矗?偶聯(lián)技術(shù)的應(yīng)用（理解并應(yīng)用）

　　第五章　 發(fā)酵過程的優(yōu)化與控制

　?。担?發(fā)酵過程的測(cè)量（應(yīng)用）　?。担?發(fā)酵過程模型化（應(yīng)用）　?。担?發(fā)酵過程控制（應(yīng)用）

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